本发明公开了一种利用干燥剂提高生物大分子结晶条件筛选成功率的方法，首先用缓冲液溶解生物大分子，使生物大分子的终浓度达到２～４０ｍｇ／ｍｌ；使用结晶筛选试剂与生物大分子溶液混合构建生物大分子结晶筛选溶液体系；使用干燥剂代替通常气相扩散法使用的池液，用于浓缩生物大分子结晶液滴，实现生物大分子的结晶。由于在气相扩散法中采用干燥剂代替池液进行浓缩结晶液滴的方式，可使蛋白质结晶条件筛选成功率由传统方法的４～１０％提高至２０～５０％。同时，由于不再使用池液，以池液体积１５０微升计算，筛选试剂消耗成本大幅下降至原成本的百分之一以下。
主权利要求：
一种利用干燥剂提高生物大分子结晶条件筛选成功率的方法，其特征在于包括以下步骤： （ａ）用缓冲液溶解生物大分子，使生物大分子的终浓度达到２～４０ｍｇ／ｍｌ； （ｂ）用缓冲液对生物大分子溶液混合构建生物大分子结晶筛选溶液体系结晶条件进行筛选； （ｃ）使用坐滴板，在每深孔中加入干燥剂，使用自动移液系统将１μｌ筛选结晶剂和１μｌ蛋白质溶液混合为结晶液滴，滴在小坐滴孔中，密封结晶板； （ｄ）将结晶板放入控温箱，恒温２０℃，放置４天后，在显微镜下观察，统计出获得溶菌酶晶体的条件数目。
申请号： 200910219491 申请日： 2009/12/15
公开日： 2010/06/02 公告日：
公开号： 101717759A 公告号：
授权日： 授权公告日：
专利类别： 发明 国别省市代码： 87[中国|西安]
代理机构代码： 61204[对照表] 代理人： 黄毅新
发明名称： 利用干燥剂提高生物大分子结晶条件筛选成功率的方法
国际分类号： C12N 9/36;C12N 9/08;C12N 9/22;C07K 14/62
范畴分类号： 18H
发明人： 尹大川;鹿芹芹;解思晓;陈瑞卿;朱丽;张仙芳
申请人： 西北工业大学
申请人地址： 陕西省西安市友谊西路127号
邮编： 710072